1 Denge epidemijos kontekstas: didėjantis pasaulinis visuomenės sveikatos iššūkis

Dengė yra ūminė uodų platinama virusinė liga, kurią sukelia dengės virusas (DENV), kuris tapo sparčiausiai pasaulyje plintančia arbovirusine liga, keliančia didelę grėsmę visuomenės sveikatos saugumui. Per pastaruosius du dešimtmečius dengės karštligės atvejų skaičius pasaulyje smarkiai išaugo, o nuo 2021 m. užregistruotų atvejų skaičius kasmet padvigubėja [1]. 2023 m. gruodžio mėn. Pasaulio sveikatos organizacija (PSO) paskelbė pasaulinę dengės karštligės ekstremaliąją padėtį, siekdama sustiprinti koordinuotas tarptautines reagavimo pastangas. PSO epidemiologiniai skaičiavimai rodo, kad maždaug 3,9 milijardo žmonių visame pasaulyje gresia dengės karštligės infekcija, o kasmet užsikrečiama apie 390 milijonų žmonių, iš kurių 96 milijonai yra kliniškai akivaizdūs atvejai [1, 2].

2 Epidemiologiniai svarbiausi įvykiai

Denge karštligės epidemiologinius požymius formuoja virusologinių veiksnių, vektorių ekologijos, šeimininko imuninio atsako ir socialinių bei aplinkos sąlygų sąveika. Išsamus šių savybių supratimas yra būtinas norint sukurti veiksmingas prevencijos ir kontrolės strategijas, taip pat tikslius diagnostikos metodus.

2.1 Perdavimo vektoriai ir miesto perdavimo modeliai

Denge virusas daugiausia perduodamasAedes aegypti ir Aedes albopictusuodai. Tarp šių vektorių rūšių Aedes aegypti yra pripažinta svarbiausiu perdavimo vektoriumi, pasižyminčiu dideliu „žmonių prisitaikymu“ ir plačiu paplitimu tropinėje ir subtropinėje miesto aplinkoje. Skirtingai nuo kitų arbovirusinių patogenų uodų vektorių, Aedes aegypti pasižymi šiomis pagrindinėmis epidemiologinėmis savybėmis:

Pirmenybė teikiama veisimuisi antropogeninėje aplinkoje (pvz., vandens talpyklose, nebenaudojamose padangose).

- Stiprus tropizmas žmogaus kraujui kaip maistinių medžiagų šaltiniui

-Dienos maitinimosi elgsena

Šie požymiai apibūdina dengės karštligę kaip tipišką„miesto infekcinės ligos“tankiai apgyvendintose vietovėse perdavimo efektyvumas yra žymiai didesnis. Su PSO susiję tyrimai parodė, kad didelio gyventojų tankumo miesto vietovėse padidėjęs uodų ir žmonių kontakto dažnis gali žymiai padidinti DENV bazinį reprodukcijos skaičių (R₀), taip paspartindamas epidemijų plitimą [2].

2.2 Pasaulinės plitimo tendencijos ir lemiantys veiksniai

Remiantis PSO ataskaitomis, per pastaruosius du dešimtmečius pasaulyje užregistruotų dengės karštligės atvejų skaičius eksponentiškai išaugo [1, 3]. Šią augimo tendenciją daugiausia lemia šie tarpusavyje susiję veiksniai:

(1) Klimato kaita: kylanti pasaulinė temperatūra ne tik plečia uodų pernešėjams tinkamų buveinių geografinį diapazoną, bet ir sutrumpina išorinį DENV inkubacinį periodą uodo šeimininko viduje, taip padidindama perdavimo efektyvumą. PSO patvirtino, kad klimato kaitos sukelti uodų tankumo pokyčiai yra patikimas dengės protrūkių erdvės ir laiko dinamikos prognozavimo veiksnys.

(2) Urbanizacija: sparti ir neplanuota miestų plėtra sukūrė gausias uodų pernešėjų veisimosi buveines, o padidėjęs populiacijos tankumas sustiprino DENV perdavimo grandinių tęstinumą.

(3) Visuotinis gyventojų judėjimas: Tarptautinės kelionės ir prekyba palengvino spartų DENV plitimą tarpvalstybiniu mastu, skatindamos perėjimą nuo atvežtinių atvejų prie nuolatinio vietinio perdavimo. PSO stebėsenos duomenys rodo, kad 2010–2021 m. Jungtinėse Valstijose buvo užregistruoti 7 528 su kelionėmis susiję dengės karštligės atvejai, iš kurių 3 135 prireikė hospitalizacijos, o 19 baigėsi mirtimi.

(4) Vektorių paplitimo plėtra: Pasauliniu mastu Aedes aegypti ir Aedes albopictus geografinis paplitimo arealas toliau plečiasi, o Aedes uodai vis dažniau įsitvirtina kai kuriose Europos dalyse. Dėl to dengė iš tradicinės regioninės epidemijos išsivystė į pasaulinę grėsmę visuomenės sveikatai.

2.3 Daugelio serotipų kocirkuliacijos ir reinfekcijos mechanizmai

Denge virusą sudaro keturi antigeniškai skirtingi serotipai (DENV-1–DENV-4). Užsikrėtus vienu serotipu, susidaro ilgalaikis apsauginis imunitetas nuo to konkretaus serotipo, tačiau nuo kitų trijų serotipų – tik laikina ir dalinė kryžminė apsauga. Plačioji populiacija yra visuotinai jautri DENV, ir tik daliai užsikrėtusių asmenų išsivysto klinikinė liga [2].

Endeminiuose regionuose dažnai vienu metu cirkuliuoja keli DENV serotipai, todėl asmenys per savo gyvenimą gali patirti kelias dengės karštligės infekcijas. PSO epidemiologiniai tyrimai nustatė, kad kelių serotipų kocirkuliacija yra pagrindinė periodiškų dengės karštligės protrūkių priežastis [1].

2.4 Antrinė infekcija ir nuo antikūnų priklausomas sustiprėjimas

Svarbus ir unikalus dengės epidemiologijos reiškinys yraantikūnų priklausomas sustiprėjimas (ADE)Antrinės infekcijos heterologiniu DENV serotipu metu pirminės infekcijos metu susidarę neneutralizuojantys antikūnai palengvina viruso patekimą į monocitus ir makrofagus, taip sustiprindami viruso replikaciją. PSO plačiai pripažįsta šį mechanizmą kaip pagrindinį patogeninį veiksnį sunkios dengės ligos, įskaitant dengės hemoraginę karštligę ir dengės šoko sindromą, atveju [1].

PSO epidemiologiniai duomenys nuolat rodo, kad asmenims, sergantiems antrine dengės infekcija, yra žymiai didesnė rizika susirgti sunkia ligos forma, palyginti su tais, kurie serga pirmine infekcija – ši savybė yra labai svarbi ligos stebėjimui ir klinikiniam valdymui. Svarbu pažymėti, kad nors antrinės infekcijos metu sunkios ligos rizika padidėja, infekcija bet kuriuo DENV serotipu gali progresuoti iki sunkios dengės ligos [1].

2.5 Nespecifinės klinikinės apraiškos ir klaidingos diagnozės rizika

Klinikiniai dengės karštligės požymiai yra nespecifiniai, ypač ankstyvosiose ligos stadijose, dažnai sutampa su kitų uodų platinamų virusinių infekcijų (pvz., čikungunijos ir Zikos virusų), taip pat tam tikrų kvėpavimo takų infekcijų, požymiais. PSO skaičiavimais, 40–80 % dengės viruso infekcijų yra besimptomės [3].

Tipinės klinikinės apraiškos apima:

Ūminis karščiavimas (trunka 2–7 dienas, gali būti dvifazis)

- Stiprus galvos skausmas ir skausmas retroorbitalinėje srityje (skausmas už akių)

- Raumenų ir sąnarių skausmas (dažnai vadinamas „kaulų lūžio karštine“)

- Geltonosios dėmės arba makulopapulinis bėrimas

- Lengvos hemoraginės apraiškos (pvz., ekchimozė, kraujavimas iš nosies, dantenų kraujavimas)

Simptominė dengė paprastai skirstoma į tris skirtingas fazes: karščiavimo fazę, kritinę fazę ir sveikimo fazę. Maždaug mažiau nei 5 % simptominių pacientų progresuoja iki sunkios dengės ligos formos. Dėl specifinių klinikinių požymių trūkumo diagnozė, pagrįsta vien klinikiniais simptomais, yra sudėtinga, o tai padidina klaidingos ir nepakankamos diagnozės riziką. PSO aiškiai pabrėžia, kad vien klinikinės diagnozės nepakanka tikslumui užtikrinti, todėl laboratorinis patvirtinimas yra būtinas [1].

 3 pagrindiniai PSO dokumento „Dengės viruso laboratoriniai tyrimai: laikinosios gairės“, 2025 m. balandžio mėn., punktai

2025 m. balandžio mėn. Pasaulio sveikatos organizacija paskelbė atnaujintas laikinąsias DENV laboratorinių tyrimų gaires, kuriose pateikiamos autoritetingos techninės gairės pasaulinei dengės karštligės diagnostikai. Šiose gairėse apibendrinami naujausi įrodymai apie dengės karštligės laboratorinius tyrimus, atsižvelgiant į tebesitęsiantį pasaulinį dengės karštligės krizės kontekstą, ir pateikiamos praktinės rekomendacijos, pritaikytos aplinkybėms, turinčioms skirtingus išteklių lygius.

3.1 Pagrindiniai testavimo strategijos principai

Gairėse pabrėžiama, kad dengės karštligės diagnozei turi būti taikoma daugiažymeninė kombinuota tyrimų strategija, pagrįsta ligos stadija [1]. Kadangi nėra universalaus diagnostikos algoritmo, tyrimų strategijos turėtų būti pritaikytos prie vietos epidemiologinių aplinkybių, atsižvelgiant į šiuos pagrindinius veiksnius [1]:

-Infekcijos stadija: tinkamiausią tyrimo metodą lemia dienų skaičius po simptomų atsiradimo.

-Mėginio tipas: viso kraujo, plazmos arba serumo tinkamumas DENV aptikimui

-Regioninė epidemiologija: lokaliai cirkuliuojantys DENV serotipai ir kitų arbovirusų kocirkuliacija

- Koinfekcijos rizika: Regionuose, kuriuose arbovirusų cirkuliacija persidengia, reikėtų apsvarstyti daugybinių tyrimų atlikimą, kad būtų galima atskirti skirtingus patogenus.

3.2 Etapais pagrįsta testavimo strategija

Remiantis PSO rekomendacijomis, dengės karštligės laboratoriniai tyrimai turėtų būti atliekami laikantis aiškių laiko tarpų, pagrįstų ligos stadija [1, 2]:

(1) Ūminės fazės tyrimas (≤7 dienos po ligos pradžios)

-Nukleino rūgšties tyrimas (molekulinis tyrimas): atvirkštinės transkripcijos polimerazės grandininė reakcija (RT-PGR) ir kiti molekuliniai metodai labai jautriai aptinka DENV RNR.

-Antigeno tyrimas: NS1 antigeno nustatymas, kuris tampa aptinkamas per 1–3 dienas nuo ligos pradžios.

Ūminės fazės metu viremijos lygis yra gana didelis, o nukleorūgščių ir antigenų tyrimai pasiekia optimalų jautrumą.

(2) Sveikimo fazės tyrimas (≥4 dienos po ligos pradžios)

Serologinis tyrimas: IgM antikūnai paprastai aptinkami maždaug 4 dieną po ligos pradžios.

Daugeliu atvejų IgM antikūnai išlieka 14–20 dienų, o kai kuriais atvejais išsilaikymas gali trukti iki 90 dienų.

IgG tyrimas yra ribotai vertingas ūminės dengės karštligės diagnozei dėl galimo kryžminio reaktyvumo antikūnų, atsiradusių po ankstesnės flaviviruso infekcijos ar vakcinacijos.

(3) Įtariamo atvejo diagnostikos algoritmas

Gairėse pateikiamas įtariamų dengės atvejų diagnostikos algoritmas, rekomenduojant tinkamus tyrimo metodus, pagrįstus dienų skaičiumi po simptomų atsiradimo: ankstyvojoje fazėje pagrindiniai metodai yra NS1 antigeno ir nukleorūgščių tyrimai, o vėlyvojoje fazėje – serologiniai tyrimai.

3.3 Bandymo metodo našumo vertinimas ir parinkimas

Pasak PSO, sistemingas įvairių dengės karštligės testavimo rezultatų ir taikomų scenarijų vertinimas yra toks:

4 Makro ir mikro bandymų dengės karštligės aptikimo produktų rekomendacijos pagal scenarijų

Siekdama paremti dengės karštligės prevenciją ir kontrolę, „Macro & Micro-Test“ teikia integruotą diagnostikos portfelį, apimantį greitą atranką, molekulinį patvirtinimą ir genominę stebėseną, tenkinant poreikius įvairiuose protrūkių valdymo etapuose.

4.1 1 scenarijus: greitas patikrinimas ir tikslinė stebėsena

Taikoma karščiavimo klinikoms, pirminės sveikatos priežiūros įstaigoms, protrūkių bendruomenės patikrinimams ir karantinui uoste / pasienyje.

-Dengės viruso NS1 antigeno greitasis testas: nustato ankstyvą infekciją (1–3 dienas po jos pradžios), o rezultatai pateikiami per 15 minučių, kad būtų galima greitai nustatyti infekcijos tipą.

-Dengės viruso IgM/IgG antikūnų tyrimas: atskiria pirmines ir antrines infekcijas, siekiant įvertinti sunkios ligos riziką.

-Dengės viruso NS1 antigeno + IgM/IgG kombinuotas greitasis testas: vienu metu aptinka antigeną ir antikūnus, kad būtų galima atlikti visą diagnozę.

-Čikungunjos viruso IgM/IgG antikūnų tyrimas: leidžia atlikti diferencinę diagnozę su dengės karštlige, kad būtų galima tiksliai nustatyti patogenus.

4.2 2 scenarijus: tiksli diagnostika ir reagavimas į ekstremalias situacijas

-Dengės viruso I/II/III/IV nukleorūgščių nustatymo rinkinys: aptinka ir diferencijuoja 4 serotipus (aptikimo riba 500 kopijų/ml) protrūkio atsekimui.

-Liofilizuotas dengės viruso PGR rinkinys: gabenamas kambario temperatūroje, tinka vietovėms, kuriose trūksta išteklių, ir staigiems protrūkiams.

-Dengue/Zika/Chikungunya daugybinis realaus laiko PGR rinkinys: vienu metu aptinka 3 arbovirusus, kad būtų galima efektyviai diferencijuoti diagnozę sudėtinguose protrūkiuose.

Visi aukščiau išvardyti reagentai yra suderinami su „AIO 800“ pilnai automatizuota mėginių apdorojimo sistema, todėl sumažėja rankinis valdymas ir kryžminė tarša, pagerėja efektyvumas ir biologinis saugumas.

4.3 3 scenarijus: Genominė stebėsena ir virusinės kilmės analizė

Taikoma nacionalinėms etaloninėms laboratorijoms, visuomenės sveikatos tyrimų įstaigoms, laikantis PSO pozicijos dėl NGS.

„Macro & Micro-Test“ genomo stebėjimo sprendimai palaiko viso genomo sekvenavimą virusų atsekimui, perdavimo grandinės išaiškinimui, variantų stebėjimui ir vakcinacijos strategijos koregavimui. Jie palaiko rankinius / automatizuotus darbo eigą, gerindami našumą ir atkuriamumą, suteikdami laboratorijoms galimybę pereiti nuo įprastinių tyrimų prie pažangios stebėsenos, atsižvelgiant į PSO akcentuojamą virusų evoliucijos stebėjimo stiprinimą.

4.4 Integruotų sprendimų vertė

„Macro & Micro-Test“ teikia išsamius diagnostikos sprendimus arbovirusų aptikimui, palaikydama kiekvieną protrūkio valdymo etapą: greito patikrinimo įrankius pirmosios linijos sveikatos priežiūros įstaigoms, molekulinį patvirtinimą tiksliai diagnozei ir viso genomo analizės galimybes epidemiologinei stebėsenai. Turėdami didelio našumo tyrimus, lanksčius darbo eigą ir automatizavimui paruoštas platformas, šie sprendimai suteikia laboratorijoms ir visuomenės sveikatos sistemoms galimybę sustiprinti pasirengimą ir reagavimą į kylančias arbovirusų grėsmes visame pasaulyje.

Nuorodos

[1] Pasaulio sveikatos organizacija. Denge viruso laboratoriniai tyrimai: laikinosios gairės, 2025 m. balandžio mėn. Ženeva: Pasaulio sveikatos organizacija; 2025 m.

[2] PSO Pasaulinės arbovirusų iniciatyvos techninė patariamoji grupė. Visuotinio pasirengimo ir reagavimo į arbovirusinių ligų grėsmes stiprinimas: raginimas imtis veiksmų. „Lancet Infect Dis.“ 2026;26(1):15–17.

[3] „The Lancet Microbe“. Denge diagnostikos dilemos įveikimas. „Lancet Microbe“. 2025;6(7):101190.