Karbapenemo atsparumo genas (KPC/NDM/OXA 48/OXA 23/VIM/IMP)
Produkto pavadinimas
HWTS-OT045 karbapenemo atsparumo geno (KPC/NDM/OXA 48/OXA 23/VIM/IMP) aptikimo rinkinys (fluorescencinė PGR)
Epidemiologija
Karbapenemų grupės antibiotikai yra netipiniai β-laktaminiai antibiotikai, pasižymintys plačiausiu antibakteriniu spektru ir stipriausiu antibakteriniu aktyvumu. Dėl savo stabilumo β-laktamazėms ir mažo toksiškumo jis tapo vienu svarbiausių antibakterinių vaistų, skirtų sunkioms bakterinėms infekcijoms gydyti. Karbapenemai yra labai stabilūs plazmidžių tarpininkaujamoms išplėstinio spektro β-laktamazėms (ESBL), chromosomoms ir plazmidžių tarpininkaujamoms cefalosporinazėms (AmpC fermentams).
Kanalas
| PGR mišinys 1 | PGR mišinys 2 | |
| Šeimos narių skaičius | IMP | VIM |
| VIC/HEX | Vidaus kontrolė | Vidaus kontrolė |
| CY5 | NDM | KPC |
| ROX | OXA48
| OXA23 |
Techniniai parametrai
| Sandėliavimas | ≤-18 ℃ |
| Galiojimo laikas | 12 mėnesių |
| Mėginio tipas | Skrepliai, grynos kolonijos, tiesiosios žarnos tepinėlis |
| Ct | ≤36 |
| CV | ≤5,0% |
| LoD | 103KSV/ml |
| Specifiškumas | a) Rinkinys aptinka standartizuotas įmonės neigiamas etalonines medžiagas, o rezultatai atitinka atitinkamų etaloninių medžiagų reikalavimus. b) Kryžminio reaktyvumo testo rezultatai rodo, kad šis rinkinys neturi kryžminės reakcijos su kitais kvėpavimo takų patogenais, tokiais kaip Klebsiella pneumoniae, Acinetobacter baumannii, Pseudomonas aeruginosa, Streptococcus pneumoniae, Neisseria meningitidis, Staphylococcus aureus, Klebsiella oxytoca, Haemophilus influenzae, Acinetobacter junii, Acinetobacter haemolyticus, Legionella pneumophila, Escherichia coli, Pseudomonas fluorescens, Candida albicans, Chlamydia pneumoniae, kvėpavimo takų adenovirusu, Enterococcus, arba mėginiais, turinčiais kitų vaistams atsparių genų CTX, mecA, SME, SHV, TEM ir kt. c) Antiinterferencija: Interferencijos testui pasirinkti mucinas, minociklinas, gentamicinas, klindamicinas, imipenemas, cefoperazonas, meropenemas, ciprofloksacino hidrochloridas, levofloksacinas, klavulano rūgštis, roksitromicinas, o rezultatai rodo, kad minėtos interferencinės medžiagos neturi interferencinės reakcijos nustatant karbapenemų atsparumo genus KPC, NDM, OXA48, OXA23, VIM ir IMP. |
| Taikomi instrumentai | „Applied Biosystems 7500“ realaus laiko PGR sistemos QuantStudio®5 realaus laiko PGR sistemos SLAN-96P realaus laiko PGR sistemos (Hongshi Medical Technology Co., Ltd.) „LightCycler®480“ realaus laiko PGR sistema „LineGene 9600 Plus“ realaus laiko PGR aptikimo sistema (FQD-96A，HangdžouBiotechnologijos) MA-6000 realaus laiko kiekybinis terminis ciklo ciklas (Suzhou Molarray Co., Ltd.) BioRad CFX96 realaus laiko PGR sistema BioRad CFX Opus 96 realaus laiko PGR sistema |
Darbo eiga
1 variantas.
Rekomenduojamas ekstrahavimo reagentas: „Macro & Micro-Test General DNA/RNA Kit“ (HWTS-301)9-50, HWTS-3019-32, HWTS-3019-48, HWTS-3019-96) (kurį galima naudoti su „Macro & Micro-Test“ automatiniu nukleorūgščių ekstraktoriumi (HWTS-3006C, HWTS-3006B)), kurį gamina „Jiangsu Macro & Micro-Test Med-Tech Co., Ltd.“. Į talijos nuosėdas įpilkite 200 μL fiziologinio tirpalo. Tolesni veiksmai turėtų atitikti ekstrakcijos instrukcijas, o rekomenduojamas eliucijos tūris yra100 μL.
2 variantas.
Rekomenduojamas ekstrahavimo reagentas: nukleorūgščių ekstrakcijos arba gryninimo reagentas (YDP302), kurį gamina „Tiangen Biotech (Beijing) Co., Ltd.“. Ekstrahavimą reikia pradėti griežtai laikantis naudojimo instrukcijos 2 veiksmo (į talijos nuosėdas įpilkite 200 μL GA buferio ir purtykite, kol talija visiškai suspenduosis). Eliucijai naudokite vandenį be RNazės/DNazės, o rekomenduojamas eliuavimo tūris yra 100 μL.
3 variantas.
Rekomenduojamas ekstrahavimo reagentas: makro ir mikro tyrimų mėginio išskyrimo reagentas. Skreplių mėginį reikia nuplauti į aukščiau minėtas apdorotas talijos nuosėdas įpilant 1 ml fiziologinio tirpalo, 5 minutes centrifuguoti 13000 aps./min. greičiu, o supernatantą išpilti (palikti 10–20 µl supernatanto). Grynoms kolonijoms ir tiesiosios žarnos tepinėliams gauti į aukščiau minėtas apdorotas talijos nuosėdas įpilama 50 μl mėginio išskyrimo reagento, o tolesni veiksmai atliekami pagal naudojimo instrukciją.
