Mycobacterium tuberculosis atsparumas nukleino rūgštims ir rifampicinui
Produkto pavadinimas
HWTS-RT074B-Mycobacterium Tuberculosis nukleino rūgšties ir rifampicino atsparumo nustatymo rinkinys (lydymosi kreivė)
sertifikatas
CE
Epidemiologija
Mycobacterium tuberculosis, trumpai vadinama Tubercle bacillus, TB, yra patogeninė bakterija, sukelianti tuberkuliozę. Šiuo metu dažniausiai vartojami pirmos eilės vaistai nuo tuberkuliozės yra izoniazidas, rifampicinas ir heksambutolis ir kt. Antros eilės vaistai nuo tuberkuliozės yra fluorokvinolonai, amikacinas ir kanamicinas ir kt. Naujai sukurti vaistai yra linezolidas, bedakvilinas, delamanis ir kt. Tačiau dėl neteisingo vaistų nuo tuberkuliozės vartojimo ir mikobakterijų tuberkuliozės ląstelių sienelių struktūros ypatybių mikobakterijos tuberkuliozė išsivysto atsparios vaistams nuo tuberkuliozės, o tai kelia rimtų iššūkių tuberkuliozės profilaktikai ir gydymui.
Rifampicinas plačiai vartojamas plaučių tuberkulioze sergantiems pacientams gydyti nuo XX a. 8-ojo dešimtmečio pabaigos ir turi didelį poveikį. Tai buvo pirmasis pasirinkimas sutrumpinant plaučių tuberkulioze sergančių pacientų chemoterapiją. Atsparumą rifampicinui daugiausia lemia rpoB geno mutacija. Nors nuolat atsiranda naujų vaistų nuo tuberkuliozės, o klinikinis plaučių tuberkulioze sergančių pacientų veiksmingumas taip pat toliau gerėja, vis dar trūksta vaistų nuo tuberkuliozės, o neracionalaus vaistų vartojimo klinikiniame tyrime reiškinys yra gana didelis. Akivaizdu, kad pacientams, sergantiems plaučių tuberkulioze, tuberkuliozės mikobakterijų neįmanoma laiku visiškai sunaikinti, todėl galiausiai paciento organizme atsiranda skirtingas atsparumo vaistams laipsnis, pailgėja ligos eiga ir padidėja paciento mirties rizika.
Kanalas
Kanalas | Kanalai ir fluoroforai | Reakcijos buferis A | Reakcijos buferis B | Reakcijos buferis C |
FAM kanalas | Reporteris: FAM, Quencher: Nėra | rpoB 507-514 | rpoB 513-520 | 38KD ir IS6110 |
CY5 kanalas | Reporteris: CY5, Malšintojas: Nėra | rpoB 520-527 | rpoB 527-533 | / |
HEX (VIC) kanalas | Reporteris: HEX (VIC), Quencher: Nėra | Vidaus kontrolė | Vidaus kontrolė | Vidaus kontrolė |
Techniniai parametrai
Sandėliavimas | ≤-18 ℃ Tamsoje |
Galiojimo laikas | 12 mėnesių |
Mėginio tipas | Skrepliai |
CV | ≤5,0% |
LoD | tuberkuliozės mikobakterijos 50 bakterijų/ml rifampicinui atsparus laukinis tipas: 2x103bakterijų/ml homozigotinis mutantas: 2x103bakterijų/ml |
Specifiškumas | Jis aptinka laukinio tipo tuberkuliozės mikobakterijas ir kitų atsparumo vaistams genų, tokių kaip katG 315G>C\A, InhA-15C>T, mutacijų vietas, tyrimo rezultatai neparodo atsparumo rifampicinui, o tai reiškia, kad nėra kryžminio reaktyvumo. |
Taikomi instrumentai: | SLAN-96P realaus laiko PGR sistemos BioRad CFX96 realaus laiko PGR sistema „LightCycler480®“ realaus laiko PGR sistema |
Darbo eiga
Jei ekstrakcijai naudojate „Macro & Micro-Test General DNA/RNA“ rinkinį (HWTS-3019-50, HWTS-3019-32, HWTS-3019-48, HWTS-3019-96) (kurį galima naudoti su „Macro & Micro-Test“ automatiniu nukleorūgščių ekstraktoriumi (HWTS-3006C, HWTS-3006B)) arba „Macro & Micro-Test Viral DNA/RNA“ kolonėlę (HWTS-3022-50), pagamintą „Jiangsu Macro & Micro-Test Med-Tech Co., Ltd.“, į teigiamos kontrolės, neigiamos kontrolės ir apdoroto skreplių mėginio iš eilės įpilkite 200 μL, o į teigiamos kontrolės, neigiamos kontrolės ir apdoroto skreplių mėginio mėginį atskirai įpilkite 10 μL vidinės kontrolės. Vėlesni veiksmai turi būti atliekami griežtai laikantis ekstrahavimo instrukcijų. Ekstrahuoto mėginio tūris yra 200 μL, o rekomenduojamas eliuavimo tūris – 100 μL.